Q 什么是外泌體？查看詳情
A外泌體(Exosome)是由不同細(xì)胞分泌的直徑30-150nm的胞外膜性囊泡(Extrocellular Visicles，EVs）。外泌體普遍存在于多種體液中，其內(nèi)容物豐富，包括蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸等，在細(xì)胞間信息交流中發(fā)揮著重要作用，主要參與免疫抗原呈遞，神經(jīng)遞質(zhì)傳遞，脂類代謝，及細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等過(guò)程，并與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、治療及預(yù)后密切相關(guān)。
Q 外泌體分離后會(huì)有沉淀試劑留在純化的外泌體中嗎？如果有的話，會(huì)對(duì)下游實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響嗎？查看詳情
A沉淀試劑不會(huì)吸附在外泌體上，所以沉淀試劑仍留在上清中，但如果在沉淀離心去除上清時(shí)沒(méi)有完全的把上清除去的話，會(huì)留下少量的沉淀試劑在外泌體中，但含量很低，可以通過(guò)透析去除。
Q 用超速離心的方法分離細(xì)胞培養(yǎng)上清的外泌體，但是電鏡下沒(méi)有找到外泌體，什么原因呢？查看詳情
A超速離心提取外泌體的量要低于外泌體沉淀試劑提取，更何況在細(xì)胞培養(yǎng)上清中外泌體的含量很低，所以分離出來(lái)的外泌體不容易找到，你可以 Nanosight analysis或者其他方法去證明你提取外泌體的含量。
Q 外泌體傳統(tǒng)的分離方法是什么？查看詳情
A傳統(tǒng)的外泌體分離方法主要采用超速離心結(jié)合蔗糖密度梯度，將低密度的外泌體從其他囊泡中分離出來(lái)，但其操作流程復(fù)雜且耗時(shí)較長(zhǎng)（大約需要8-24h），盡管這樣，超速離心仍然是最為流行的外泌體分離方法。在過(guò)去的幾年里，一些由于細(xì)胞培養(yǎng)基和各種體液的外泌體分離試劑盒已經(jīng)商業(yè)化了，潤(rùn)基生物的外泌體提取和純化試劑盒是一種操作方便，提取外泌體純度高的外泌體提取工具，相信這款產(chǎn)品會(huì)越來(lái)越受歡迎。
Q 外泌體提取試劑盒的工作原理是什么？如何把外泌體分離出來(lái)？查看詳情
A是通過(guò)一種聚合物將外泌體分離的，這種聚合物會(huì)破壞溶液中的水分子，使囊泡顆粒（包括外泌體）和一些較大蛋白質(zhì)溶解度降低，通過(guò)低速離心就可以沉淀收集。
Q 我如何確保提取外泌體不是細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞碎片等）？查看詳情
A當(dāng)你從細(xì)胞培養(yǎng)基或各種體液分離外泌體前，首先需要經(jīng)過(guò)樣本預(yù)處理，樣本先經(jīng)過(guò)低速離心，就可以去除細(xì)胞和細(xì)胞碎片，處理后樣本中只留有外泌體，囊泡和蛋白質(zhì)。
